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說(shuō)說(shuō)Kromasil液相色譜柱的三個(gè)基本要點(diǎn)

更新時(shí)間:2022-07-22      點(diǎn)擊次數(shù):1024
  Kromasil液相色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開(kāi)發(fā)所需的時(shí)間,并且使方法更具穩(wěn)定性。但是現(xiàn)在市場(chǎng)上色譜柱種類(lèi)繁多,不同類(lèi)型的色譜柱分離對(duì)象不同,因此,要做合適的選擇,要對(duì)此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。
 
  Kromasil液相色譜柱是色譜分析過(guò)程中重要的部分,相當(dāng)于人體的“心臟”。根據(jù)自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱,需要考慮不同參數(shù)將會(huì)造成什么影響,比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。
 
  Kromasil液相色譜柱的三個(gè)基本要點(diǎn)
 
  1.柱的構(gòu)造
 
  Kromasil液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70Kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過(guò)拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細(xì)管柱。液相色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2-20um(5-10um),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出,柱內(nèi)徑一般是根據(jù)柱長(zhǎng)、填料粒徑和折合流速來(lái)確定,目的是為了避免管壁效應(yīng)。
 
  2.柱的發(fā)展方向
 
  因強(qiáng)調(diào)分析速度而發(fā)展出短柱,柱長(zhǎng)3~10cm,填料粒徑2~3um。為提高分析靈敏度,與質(zhì)譜(MS)聯(lián)接,而發(fā)展出窄徑柱、毛細(xì)管柱和內(nèi)徑小于0.2mm的微徑柱(MICROBORE)。細(xì)管徑柱的優(yōu)點(diǎn)是:①節(jié)省流動(dòng)相;②靈敏度增加;③樣品量少;④能使用長(zhǎng)柱達(dá)到高分離度;⑤容易控制柱溫;⑥易于實(shí)現(xiàn)LC-MS聯(lián)用。
 
  但由于柱體積越來(lái)越小,柱外效應(yīng)的影響就更加顯著,需要更小池體積的檢測(cè)器(甚至采用柱上檢測(cè)),更小死體積的柱接頭和連接部件。配套使用的設(shè)備應(yīng)具備如下性能:輸液泵能精密輸出1~100ul/min的低流量,進(jìn)樣閥能準(zhǔn)確、重復(fù)地進(jìn)樣微小體積的樣品。且因進(jìn)樣量小,要求高靈敏度檢測(cè)器,電化學(xué)檢測(cè)幫質(zhì)譜儀在這方面具有突出優(yōu)點(diǎn)。
 
  3.柱的填充
 
  Kromasil液相色譜柱的性能除了與固定相性能有關(guān)外,還與填充技術(shù)有關(guān)。在正常條件下,填料粒度>20um時(shí),干法填充制備柱較為合適;顆粒<20um時(shí),濕法填充較為理想。填充方法一般有四種:①高壓勻漿法,多有用于分析柱和小規(guī)模制備柱的填充;②徑向加壓法;③軸向加壓法,主要用于裝填大直徑柱;④干法,柱填充的技術(shù)性強(qiáng),大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室使用己填充好的商品柱。
 
  必須指出,Kromasil液相色譜柱的獲得,裝填技術(shù)是重要環(huán)節(jié),但根本問(wèn)題還在于填料本身性能的優(yōu)劣,以及配套的色譜儀系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)是否合理。
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